【检验原理】
蛋白胨、胰酪胨提供氮源和碳源;氯化钠维持渗透压;琼脂是培养基凝固剂;抑制剂和配套试剂B可抑制其它杂菌的生长;色素和配套试剂A可使单增李斯特氏菌形成蓝绿色规测光滑的小菌落,周围有乳白色脂肪沉淀环。
【配方成分】
成分 | 含量(每升) |
蛋白胨 | 28.0g |
胰酪胨 | 6.0g |
琼脂粉 | 15.0g |
氯化钠 | 5.0g |
色素 | 2.1g |
抑制剂 | 15.0g |
蒸馏水 | 1000mL |
终 pH | 7.0±0.2 |
【使用方法】
1. 平板凝胶培养基使用:待检样品按照相应的标准(GB、SN、FDA等)进行处理后,取适量样品液接种于该培养基上,于36±1℃培养18~24 h,观察结果,挑取典型可疑菌落进行鉴定。
2. 脱水干粉培养基使用:首先、称取本品干粉7.11g,用95mL蒸馏水或去离子水溶解,搅拌加热煮沸至*溶解,121℃高压蒸汽灭菌15min;另外,称取配套试剂A(SR0470)0.2g加入4ml蒸馏水或去离子水中,充分混匀成均一乳白色溶液(可借用磁力搅拌器或涡漩混合器) 121℃高压蒸汽灭菌15min,之后冷至约50℃备用。接着,取1支配套试剂B(SR0470)分别加入1mL无菌水,使之*溶解。后,将配套试剂A和B加入到约50℃基础培养基中,充分混匀后倾注无菌平皿,制成平板培养基备用。(注:配套试剂A在倾注平板前应与基础和配套试剂B充分混匀,否则会影响菌落特征观察。)
3. 瓶装凝胶培养基使用:将1瓶装凝胶培养基置于100℃水浴中加热至*溶解后冷却至50℃备用。取1支配套试剂B(SR0470)加入1mL无菌水,使之*溶解。将1瓶配套试剂A(4ml/瓶)和1支配套试剂B加入到约50℃的基础培养基中,充分混匀后备用。(注:配套试剂A在倾注平板前应与基础和配套试剂B充分混匀,否则会影响菌落特征观察。)
【质量控制】
1. 外观方面 脱水干粉培养基:淡黄色粉末; 配套试剂A:黄色粉末(或乳白色溶液);配套试剂B:白色冻干粉。 平板凝胶/瓶装凝胶培养基:淡黄色凝胶。
2. 生物学方面 下列质控菌株接种待测试培养基,36℃±1℃培养24-48h,结果如下:
质控菌株及编号 | 指标 | 质控评判标准 |
单核细胞增生李斯特ATCC19115 | 生长率 | PR≥0.5,蓝绿色光滑规则小菌落,周围有乳白色脂肪沉淀环。 |
英诺克李斯特ATCC33090 | 特异性 | 蓝色至蓝绿色 |
大肠埃希氏菌ATCC25922 | 选择性 | G≤1 |
粪肠球菌ATCC29212 |
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