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kromasil色谱柱是利用离子交换机理来吸附的

更新时间:2023-02-07  点击量:481
   kromasil色谱柱是在新型的更高惰性硅胶基质上键合通用性的十八烷基官的色谱柱,由于其高惰性,大幅度提高了分析的精度和重现性。它可以用于分离离子化的化合物而不易引起吸附,因此能够得到非常尖锐的峰形和优异的重现性。
 
  kromasil色谱柱的基本原理是样品在两相之间的分配,即在固相(吸附剂)和液相(溶剂)之间的分配。保留或洗脱的机制取决于被分析物与吸附剂表面的活性基团,以及被分析物与液相之间的分子作用力。其洗脱模式有两种:一种是目标化合物比干扰物与吸附剂之间的亲和力更强,因而被保留,洗脱时采用对目标化合物亲和力更强的溶剂;另一种是干扰物比目标化合物与吸附剂之间的亲和力更强,则目标化合物被直接的洗脱。通常采用前一种洗脱方式。
 
  要有效地利用离子交换机理将目标化合物吸附在kromasil色谱柱上,必须满足以下条件:
 
  1、目标化合物离子与吸附剂官能团的离子态带相反电荷。
 
  2、萃取环境的pH必须同时使目标化合物和吸附剂上的官能团带电荷。
 
  3、萃取环境不能含有高浓度的带有和目标化合物相同电荷的竞争化合物。
 
  在实际操作中,为了满足前两个条件,确保目标化合物及吸附剂上的官能团能够呈离子态或呈中性状态,应该根据目标化合物及吸附剂官能团的pKa来调节样品或色谱柱的pH。在pH2~12范围内呈现出较高的化学稳定性,使其可以在碱性条件下被使用。较宽的pH范围还可以使用多碱性化合物在非带电形式下得到分析,减少了二次相互作用发生进而改善分析峰形。由于二次相互作用的降低,大大改善了对肽和蛋白质的回收。
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